肠致病性大肠埃希菌EspB基因的体外诱导表达研究

作者：郑金鑫; 刘晓军; 李多云; 马桂红; 潘伟光; 陈重; 余治健; 邓启文

来源：深圳中西医结合杂志, 2013, (04): 193-196.

DOI：10.16458/j.cnki.1007-0893.2013.04.001

• 肠致病性大肠埃希菌
• EspB基因
• 重组质粒
• 蛋白诱导表达
• 蛋白质印迹试验 Enteropathogenic E.coli(EPEC)
• EspB gene
• Recombinant plasmid
• Protein induction expression
• Western blot

目的:研究肠致病性大肠埃希菌(enteropathogenic E.coli,EPEC)EspB基因的体外诱导表达情况,获得纯化的EspB蛋白。方法:体外构建重组质粒pET-28a-EspB,转化BL21感受态细菌培养,提取重组质粒并行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。重组质粒pET-28a-EspB经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹试验(Western blot)分析。pET-28a-EspB表达产物再次经纯化,获得的纯化蛋白进一步经SDS-PAGE和蛋白质Western blotting分析验证。结果:经双酶切和测序验证...

• 单位
  广东医科大学; 深圳市南山区人民医院