摘要

目的 观察不同浓度二甲双胍对人卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和miR-409-3p表达的影响。方法 选取2020年6—12月在青岛市妇女儿童医院生殖医学中心进行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)助孕的多囊卵巢综合征(PCOS)病人(PCOS组)和无PCOS不孕病人(对照组)各20例,收集其卵巢颗粒细胞。采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测卵巢颗粒细胞中miR-409-3p的相对表达量。体外培养人卵巢颗粒细胞系KGN,采用CCK8法检测不同浓度(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mmol/L)二甲双胍作用KGN细胞24、48和72 h的细胞活力,并计算半抑制浓度(IC50)值;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;应用EDU染色试剂盒检测细胞增殖活性;采用Q-PCR方法检测KGN细胞中miR-409-3p表达水平的变化。结果 PCOS组的黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)、抗缪勒管激素(AMH)、睾酮(T)和获卵数均显著高于对照组(t=3.49~9.79,P<0.05)。与对照组相比,PCOS组卵巢颗粒细胞中miR-409-3p相对表达量显著降低(t=2.91,P<0.05)。二甲双胍对KGN细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用,且具有浓度依赖性;二甲双胍可以促进KGN细胞miR-409-3p的表达(F=556.63,P<0.01)。结论 5.0、10.0、20.0 mmol/L的二甲双胍对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡均可发挥调节作用。二甲双胍可能通过上调miR-409-3p的表达调控颗粒细胞的增殖和凋亡,对PCOS排卵异常的恢复可能有积极作用。