问号钩端螺旋体fliN基因原核表达及其产物的鉴定

作者：孙琦; 陈蔚青; 孙爱华; 严杰

来源：中国人兽共患病学报, 2008, (01): 30-32+62.

• 问号钩端螺旋体
• fliN基因
• 克隆
• 原核表达
• 鉴定 Leptospira interrogans
• fliN gene
• cloning
• prokaryotic expression identification

目的克隆问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株鞭毛相关基因fliN并构建其原核表达系统,鉴定表达产物的免疫性。方法提取钩体株基因组DNA,高保真PCR扩增全长fliN基因片断,T-A克隆后测序。按常规方法构建fliN基因原核表达系统,并用IPTG诱导目的重组蛋白rFliN表达。采用SDS-PAGE结合Bio-Rad凝胶图象分析系统检测rFliN表达量,Ni-NTA亲和层析法提纯rFliN。采用兔抗问号钩体黄疸出血群赖株全菌抗血清的Western blot鉴定rFliN及其免疫反应性。结果与报道的相应序列比较,所克隆的fliN基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100%。IPTG诱导原核表达系...

• 单位
  浙江树人大学; 杭州医学院