摘要

目的 探讨牛蒡子苷(arctiin,ARC)对人宫颈癌细胞恶性增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法 将不同浓度ARC作用于人宫颈癌细胞Hela,用CCK-8法检测细胞存活情况,筛选最佳抑制浓度;将对数生长期Hela细胞随机分为对照组、ARC组、ARC联合自噬抑制剂(3-MA)组。用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;用DCFH-DA检测各组细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;用透射电镜观察各组细胞自噬小体;反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、哺乳动物雷帕霉菌靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)mRNA和蛋白表达及哺乳动物ATG6同源蛋白(mammalian ATG6 homologous protein, Beclin-1)和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)蛋白的表达情况。结果 与对照组比较,ARC组细胞ROS水平、PI3K、Akt和mTOR mRNA、PI3K、p-Akt以及p-mTOR蛋白的表达水平降低,且Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达水平升高(P<0.05)。3-MA可逆转ARC组上述指标(P<0.05)。结论 ARC对人宫颈癌细胞Hela的恶性增殖有一定的抑制作用,并能提高宫颈癌细胞自噬水平,可能是通过调节细胞ROS水平,影响ROS/PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥作用。