NbMVKa与新竹番茄曲叶病毒AV2蛋白互作对病毒致病性的影响

作者：李丁山; 韩星; 林文忠; 查晴辰; 张文文; 杜振国; 张洁^*; 吴祖建

来源：农业生物技术学报, 2023, 31(09): 1924-1934.

• 新竹番茄曲叶病毒(ToLCHsV)
• AV2蛋白
• 邻近依赖的生物素鉴定(BioID)
• 本氏烟甲羟戊酸激酶a(NbMVKa)

单组分双生病毒V2蛋白在病毒侵染过程中行使重要功能，而双组分双生病毒AV2蛋白功能的研究相对较少。为揭示双组分双生病毒新竹番茄曲叶病毒(Tomato leaf curl Hsinchu virus, ToLCHsV) AV2蛋白功能，本研究利用邻近依赖的生物素鉴定(proximity-dependent biotin identification, BioID)-质谱联用技术，在本氏烟(Nicotiana benthamiana)中初步筛选出与AV2邻近的多个寄主蛋白。利用酵母双杂交(yeast two hybrid, YTH)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation, BiFC)验证了本氏烟甲羟戊酸激酶a(N. benthamiana mevalonate kinase a, NbMVKa)和ToLCHsV-AV2存在互作。利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)诱导的基因沉默技术，将ToLCHsV侵染性克隆接种NbMVKa沉默的本氏烟，接种10 d后，NbMVKa沉默的本氏烟症状不明显，而未沉默植株表现叶片卷曲，同时利用Southern blot分析发现，沉默植株的病毒DNA积累量相对减少；接种20 d后，NbMVKa沉默的本氏烟和未沉默植株症状基本一致。结果表明，NbMVKa可能通过与ToLCHsV-AV2互作而对病毒致病起正调控的作用。本研究结果为进一步阐明双组分双生病毒AV2蛋白功能提供理论依据。

• 单位
  福建农林大学