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摘要
原肌球蛋白(Tropomyosin， TM)被认为是甲壳类和贝类的主要过敏原，为了应对与日俱增的甲壳类和贝类过敏风险，本研究以南美白对虾(Litopenaeus vannamei)的TM富集液为抗原免疫BALB/c小鼠，通过杂交瘤细胞融合技术筛选获得1株南美白对虾过敏原TM的单克隆抗体细胞株2F8，并利用ELISA、Western Blot、生物信息学等方法对2F8单抗进行免疫学特性分析，确定其效价、特异性、抗体亚型、结合区域，以TM的特异性单抗2F8和兔多抗构建双抗夹心胶体金试纸条分析单抗2F8的应用可行性。结果显示，单抗2F8的抗体亚型为IgG1型、效价为1.28×105，抗体与TM抗原的IC50值为20.21，亲和力高；纯化的单抗2F8可以特异性识别甲壳类、贝类和鱿鱼的主要过敏原TM，存在3个潜在的TM抗原结合区域AA0-31，AA38-43和AA58-67。制备的试纸条检测结果显示，该试纸条可在10 min内目测5 ng/mL的南美白对虾TM(相当于12.5 μg/kg)，且可用于甲壳类和贝类肌肉中TM 的检测，研究表明所制备的2F8单抗亲和力高，可用于虾蟹贝和鱿鱼中的过敏原TM的鉴定与检测，具有较好的应用价值。本研究为过敏原TM的鉴定和检测提供了重要生物材料，也为今后TM的快速检测试剂盒开发提供了技术支持。
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