荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究

作者：王亮; 刘婷婷; 彭涛; 朱海; 汪汉卿; 曹旭

来源：黑龙江畜牧兽医, 2006, (05): 9-12.

• 荷斯坦奶牛
• 成纤维细胞
• 体外培养
• 冷冻保存
• 活细胞率
• 细胞贴壁率 Holstein milk cow
• fibroblast
• in vitro culture
• cryopreservation
• living cell rate
• adherence rate

试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究。结果表明:用DMEM/F12+20%胎牛血清+100IU/mL双抗的完全培养液进行组织块培养,能获得良好的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞原代培养物;成纤维细胞混合培养物经TrypsinEDTA(0.25%Trypsin,1mmol/LEDTA.4Na)消化所收集到的细胞主要为成纤维细胞,经2~3代传代,可得到纯化的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞。纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的条件下,选用5种不同的冷冻保存方法进行冷冻保存,其中使用70%细胞悬液+20%胎牛血清+10%DMSO的冷冻保存悬液,先在4℃预冷平衡...

• 单位
  中国科学院新疆理化技术研究所; 中国科学院兰州化学物理研究所