摘要
目的:探讨长链非编码RNA CBR3-AS1(LncRNA CBR3-AS1)在骨肉瘤患者中的表达及意义。方法:回顾性收集2012年1月—2014年1月本院收治的66例骨肉瘤患者组织标本和临床资料,qRT-PCR法检测组织中LncRNA CBR3-AS1表达情况,并将患者分为高表达组和低表达组,卡方检验分析LncRNA CBR3-AS1表达与临床参数的关系,Kaplan-Meier法比较Lnc RNA CBR3-AS1的表达与总生存率的关系。将U-2 OS细胞系分成LncRNA CBR3-AS1沉默表达组(si-CBR3-AS1组)和阴性对照组(si-NC组),经LipofectamineTM3000分别转染LncRNA CBR3-AS1 siRNA和si-NC序列,MTT和集落形成试验测定细胞增殖,细胞迁移和侵袭试验测定细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术测定细胞凋亡。q RT-PCR和Western blot法检测羧基还原酶3(CBR3)的表达。结果:LncRNA CBR3-AS1在骨肉瘤组织和细胞系中高表达(P <0.001)。LncRNA CBR3-AS1高表达与Enneking分期(P <0.001)、远处转移(P=0.004)和组织学分级(P=0.036)显著相关;LncRNA CBR3-AS1高表达与骨肉瘤患者总生存率呈负相关(P <0.01),是骨肉瘤患者的不良预后因素(HR=1.558,95%CI:1.041~2.641,P=0.013)。si-CBR3-AS1组细胞增殖、集落形成能力、细胞迁移和侵袭能力显著低于si-NC组,si-CBR3-AS1组细胞凋亡率高于si-NC组。LncRNA CBR3-AS1和CBR3mRNA表达呈正相关(r=0.44,P=0.036),si-CBR3-AS1组CBR3 mRNA和蛋白表达量显著低于si-NC组(P <0.001)。结论:LncRNA CBR3-AS1在骨肉瘤中高表达,LncRNA CBR3-AS1下调表达抑制细胞增殖、迁移及侵袭,促进凋亡,是影响骨肉瘤预后的独立危险因素。
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单位华中科技大学; 同济医学院附属武汉中心医院