摘要
目的观察补肾化痰方对卵巢切除大鼠骨髓间充质干细胞保护作用。方法 3月龄SD雌性大鼠36只,随机分为6组,除假手术组外,其余各组均以卵巢切除术(OVX)造模,术后分组分笼常规饲养10周。各组大鼠分别给予生理盐水、中药药液、骨化三醇药液灌胃给药7天后制备血清。将假手术组及卵巢切除大鼠F3代骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells, BMSC)复苏培养后制备成单细胞悬液,依次分为对照组(Control),卵巢切除组(OVX),卵巢切除+补肾化痰含药血清高剂量组(OVX+H-BS),卵巢切除+补肾化痰含药血清中剂量组(OVX+M-BS),卵巢切除+补肾化痰含药血清低剂量组(OVX+L-BS),卵巢切除+骨化三醇含药血清组(OVX+A-S)。分别采用β-半乳糖苷酶活性染色、细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK8)评估细胞增殖能力,采用ELISA试剂盒检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor, TNF-α)等炎症因子的表达。结果与对照组(Control)相比,OVX大鼠β-半乳糖苷酶活性染色阳性细胞数量明显增多,细胞增殖能力明显下降,IL-6、IL-10、IL-1α、IL-1β、TNF-α等炎症因子明显增加;与卵巢切除组(OVX)组相比,中药及西药组大鼠β-半乳糖苷酶活性染色阳性细胞数量显著性下降,细胞增殖能力升高,IL-6、IL-10、IL-1α、IL-1β、TNF-α等炎症因子减少,其中高剂量组(OVX+H-BS)骨化三醇含药血清组(OVX+AS)差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾化痰方能够减缓BMSC细胞的衰老,增强细胞增殖能力,减轻细胞炎症反应,从而减少BMSC的凋亡,起到防治骨质疏松的作用。
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