抗GBM抗体特异性单链抗体scFv3原核表达载体的构建及表达

作者:王雅楠; 刘章锁; 邢国兰; 赵国强; 肖静; 王沛
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2010, (03): 255-257.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.005403

摘要

目的:构建单链抗体scFv3的原核表达载体pET28a-scFv3并诱导表达,纯化并检测表达产物的免疫抗原性。方法:用PCR扩增抗肾小球基底膜(GBM)抗体单链抗体scFv3基因,构建pGEM-scFv3重组质粒并测序。将重组基因亚克隆于原核表达载体pET28a( )中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析法纯化,用间接ELISA检测纯化的单链抗体scFv3的免疫抗原性。结果:酶切和测序证实得到的scFv3基因序列正确。间接ELISA检测表明,纯化获得的scFv3能与抗GBM抗体结合。结论:成功构建了pET28a-scFv3原核表达系统并获得纯化的scFv3蛋白。表达产物...

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