MiR-30a靶向Keap1缓解大鼠脑缺血再灌注损伤的机制研究

作者：吴亚琨; 姚佳; 冯凯^*

来源：中国医师杂志, 2021, 23(01).

• 脑缺血
• 再灌注损伤
• 氧化性应激
• 微RNAs
• Kelch样ECH相关蛋白1
• 大鼠

目的研究大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤中miR-30a的功能及其作用机制。方法血管内栓线法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脑组织中miR-30a的表达变化;大鼠侧脑室注射miR-30a慢病毒后,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测大鼠脑梗死面积,Bederson法检测大鼠神经功能缺损程度,酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织3-硝基酪氨酸(3-NT)和一氧化氮(NO)浓度,Western blot检测脑组织kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子(Nrf-2)和1型血红素氧合酶(HO-1)蛋白水平。双荧光素酶报告实验检测miR-30a与Keap1的靶向关系。结果与假手术组比,脑I/R后miR-30a的表达呈时间依赖性下调。而miR-30a过表达可在病理水平减小大脑梗死组织面积,功能水平降低神经功能缺损程度,分子水平降低脑组织3-NT、NO、Keap1水平,增强Nrf2和HO-1表达。而双荧光素酶报告实验也显示miR-30a可与Keap1 mRNA靶向结合。结论 MCAO大鼠脑组织中miR-30a的表达下调,并且miR-30a可通过靶向Keap1缓解大鼠脑I/R损伤。