产单核李斯特菌的改良分子信标荧光PCR-磁捕获快速检测体系的建立

作者：王冰; 扈庆华; 石晓路; 李庆阁; 郑琳琳; 林一曼; 段永翔

来源：现代预防医学, 2009, 36(13): 2512-2514.

• 产单核李斯特菌
• 改良分子信标
• 实时PCR
• 检测
• 免疫磁珠捕获 Listeria monocytogenes
• Modified molecular beacon
• Real-time PCR
• Detection
• Immunomagnetic beads capture

[目的]建立改良分子信标荧光PCR-磁捕获快速检测产单核李斯特菌(LMO)的体系,应用于食品中LMO的污染状况调查及食物中毒快速诊断。[方法]根据GenBank公布的LMOhlyA基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标荧光PCR检测体系。运用磁捕获材料对PCR检测阳性的增菌液进一步处理后划平皿做分离培养。[结果]改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为110fg,菌液灵敏度为99cfu/ml或4cfu/PCR反应体系,无交叉反应。以此反应体系检测28株LMO,均出现特异的荧光信号。对228份食品进行LMO检测,8份增菌液LMO实时荧光PCR阳性。用磁捕获材料处理此8...

• 单位
  厦门大学; 生命科学学院; 深圳市南山区疾病预防控制中心; 深圳市疾病预防控制中心