miR-30a-5p靶向作用蛋白激酶B基因促进骨关节炎患者软骨细胞的凋亡

作者：沈鹏飞; 瞿玉兴; 王斌; 徐建达; 魏康; 谢子康; 马勇^*

来源：中华医学杂志, 2017, 97(39): 3079-3084.

• 软骨细胞
• 骨关节炎
• 软骨组织
• miR-30a-5p
• 蛋白激酶B

目的观察miR-30a-5p在骨关节炎(OA)患者软骨组织中的表达及其对软骨细胞凋亡的作用机制。方法 2015年5月至2016年12月, 收集南京中医药大学附属常州中医医院骨科289例OA软骨组织标本。聚合酶链反应(qPCR)检测不同患者软骨组织中miR-30a-5p以及蛋白激酶B(Akt) mRNA的表达情况, Tunel法检测软骨细胞凋亡情况, 免疫印迹法组织和细胞中相关蛋白的表达, 流式细胞仪检测不同细胞凋亡情况和细胞周期。结果 OA患者软骨组织miR-30a-5p相对表达量显著高于非OA[(3.64±0.95)比(1.03±0.31), P<0.05], Akt基因表达较非OA显著下调[(0.41±0.17)比(1.08±0.26), P<0.05];miR-30a-5p在OA患者软骨组织中的表达与Akt mRNA表达呈负相关(r=0.729 3, P<0.001), 与细胞凋亡率呈正相关(r=0.847 5, P<0.001);在SW1353细胞内miR-30a-5p靶向负调控Akt基因表达, 高表达的miR-30a-5p显著下调p-Akt, IkB-α, p-IkB-α, p65, p-p65和mTOR基因, p-mTOR蛋白表达(P<0.05);与正常SW1353细胞相比, 转入miR-30a-5p-mimics的SW1353细胞凋亡率增加9.65倍, G0/G1期细胞增加1.37倍, S期细胞降低了60.94%, G2/M期细胞降低了19.53%。结论 miR-30a-5p在OA患者软骨组织中呈现高表达, 并且其高表达可以通过靶向作用Akt基因而将软骨细胞阻滞在G0/G1期, 进而诱导软骨细胞的凋亡。

• 单位
  南京中医药大学