摘要
目的:探讨miR-520a-3p调控宫颈癌细胞因子分泌的分子机制。方法:通过Target Scan Human分析miR-520a-3p与NF-κB复合体亚基RELA的匹配情况,然后通过荧光素酶报告系统检测miR-520a-3p是否靶向NF-κB复合体亚基RELA;使用LPS刺激宫颈癌HELA细胞后,将miR-520a-3p mimics与转染试剂混合后滴入HELA细胞中,此为过表达组;将miR-520a-3p inhibitor与转染试剂混合后滴入HELA细胞中,此为敲低组,通过酶联免疫吸附试验检测过表达组和敲低组GCSF,GM-CSF,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-9,IL-10,IL-12 p40,IL-12 p70,IL-13,IL-17,IFN-γ,MCP-1,MCP-5,RANTES,TNFα的表达水平。每次实验重复3次。结果:miR-520a-3p靶向RELA的3’UTR; LPS激活NF-kB信号通路后,宫颈癌HELA细胞分泌的细胞因子GCSF,GM-CSF,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-9,IL-10,IL-12 p40,IL-12 p70,IL-13,IL-17,IFN-γ,MCP-1,MCP-5,RANTES,TNFα的蛋白表达水平上升(P<0.05);过表达组中NF-κB复合体亚基RELA的蛋白表达水平下降,宫颈癌HELA细胞分泌的上述细胞因子的蛋白表达水平下降(P<0.05);敲低组中NF-κB复合体亚基RELA的蛋白表达水平上升,宫颈癌HELA细胞分泌的上述细胞因子的蛋白表达水平上升(P<0.05)。结论:miR-520a-3p通过靶向NF-κB信号通路的关键分子RELA抑制宫颈癌HELA细胞的细胞因子分泌。
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单位恩施土家族苗族自治州中心医院; 神经内科