铅暴露诱导铜蓄积对小鼠神经元氧化应激的促进作用

作者：王德胜; 郑刚; 王涛; 赵再华; 陈景元^*

来源：神经解剖学杂志, 2022, 38(04): 367-373.

DOI：10.16557/j.cnki.1000-7547.2022.04.001

• 铅
• 铜蓄积
• 铜转运蛋白
• 氧化应激
• 过氧化损伤
• 小鼠

目的:探讨铅(Pb)暴露诱导小鼠神经元铜(Cu)蓄积，促进细胞氧化应激损伤的机制。方法:C57BL/6小鼠饮用300 ppm醋酸铅水溶液2个月建立铅暴露动物模型；小鼠海马神经元细胞系HT22细胞暴露于0～100μmol/L醋酸铅24 h,采用噻唑蓝(MTT)法筛选适宜的铅作用剂量，建立铅暴露细胞模型。石墨炉原子吸收分光光度法(AAS)检测铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞铜水平变化；Western Blot法检测铅暴露对小鼠脑组织和HT22细胞中铜转运蛋白1(CTR1)、铜转运ATP酶α肽(ATP7A)、铜转运ATP酶β肽(ATP7B)表达水平的影响；2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法、硫代巴比妥酸比色法(TBA)分别测定铅暴露后HT22细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)活性变化情况，并观察特异性铜螯合剂四硫代钼酸铵(TTM)的保护作用。结果:与对照组相比，铅暴露组小鼠血铜水平降低，而皮质和海马组织铜水平均显著升高(P<0.05);以5、10μmol/L铅暴露24 h后，HT22细胞的铜吸收呈剂量-依赖性增高(P<0.05)。铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞中CTR1蛋白水平显著增高，而ATP7A和ATP7B蛋白水平显著降低(P<0.05)。铅暴露引起HT22细胞ROS、MDA水平较对照组呈剂量-依赖性升高(P<0.05);而TTM的处理逆转了铅暴露引起的氧化应激(P<0.05)。结论:铅暴露可能通过影响神经元铜转运蛋白水平导致细胞铜蓄积，进而诱导细胞氧化应激损伤。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 中国人民解放军总医院