摘要
目的:建立HPLC-MS/MS法测定人血清中达托霉素浓度,并应用于临床患者达托霉素血药浓度监测。方法:以达托霉素-d5为内标,甲醇、乙腈沉淀蛋白法处理样品。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC C8柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)柱;流动相为A相:水+0.1%甲酸、B相:1∶1甲醇∶乙腈+0.1%甲酸;流速0.4 ml·min-1;柱温45℃;电喷雾离子化正离子模式,多反应离子监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别是达托霉素m/z 810.70→m/z 159.05、m/z 810.70→m/z 313.30、m/z 810.70→m/z 341.05,达托霉素-d5(内标物)m/z 813.50→m/z 163.2、m/z 813.50→m/z 317.2;进样量2μl;分析时间为4 min。结果:人血清中达托霉素浓度在1~200μg·ml-1线性关系良好(r=0.999 5),定量下限为0.05μg·ml-1。低、中、高浓度达托霉素的提取回收率均>90%,方法回收率>80%,日内、日间精密度RSD均<15%。结论:本研究建立的检测达托霉素在血清中浓度的LC/MS-MS方法符合生物样品测定要求,适用于临床达托霉素血药浓度检测。
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单位武汉大学中南医院