摘要
目的探讨AF1q在食管癌中的表达及对细胞增殖和转移的影响。方法选取2018年1月到2022年1月商丘市第一人民医院收集的47例食管癌和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹分析食管癌和癌旁组织AF1q mRNA和蛋白质表达水平;在人食管癌细胞株TE-1细胞采用慢病毒感染建立对照组和AF1q KD组稳定细胞系, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、体外移植瘤、划痕实验、Transwell分析对照组和AF1q KD组细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用荧光定量PCR分析AF1q下游基因的表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中AF1q mRNA表达水平(1.05±0.18)明显低于食管癌组织AF1q mRNA表达水平(2.10±0.17), 差异有统计学意义(t=28.960, P<0.05)。蛋白质印迹法(Western blot)结果显示, 癌旁组织中AF1q蛋白表达水平(0.75±0.10)明显低于食管癌组织AF1q蛋白表达水平(1.52±0.21), 差异有统计学意义(t=23.460, P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(2.03±0.11)明显高于AF1q KD组细胞(1.39±0.09), 差异有统计学意义(t=10.900, P<0.05)。对照组细胞裸鼠体内30 d肿瘤体积[(806.83±47.88) mm3]明显高于AF1q KD组细胞[(529.83±34.37) mm3], 差异有统计学意义(t=11.510, P<0.05)。对照组细胞裸鼠体内30 d肿瘤重量[(3.37±0.41) g]明显高于AF1q KD组细胞[(2.24±0.22) g], 差异有统计学意义(t=5.918, P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(85.83±4.71)%]明显高于AF1q KD组细胞[(65.83±7.36)%], 差异有统计学意义(t=5.607, P<0.05)。Transwell结果显示, 对照组细胞侵袭数量[(150.50±18.49)个]明显高于AF1q KD组细胞[(86.33±6.44)个], 差异有统计学意义(t=8.027, P<0.05)。对照组细胞Wnt1、β-catenin和CD44蛋白表达水平(1.43±0.12、1.17±0.09、1.21±0.09)明显高于AF1q KD组细胞(1.06±0.05、0.70±0.09、0.85±0.05), 差异有统计学意义(t=6.950、8.287、8.158, P<0.05)。结论 AF1q在食管癌中呈高表达, 通过调控Wnt信号通路参与食管癌细胞增殖, 迁移和侵袭等过程。
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单位徐州医科大学; 商丘市第一人民医院; 河南省人民医院