超声微泡介导沉默T淋巴细胞Itch基因对胃癌MFC细胞免疫杀伤作用的实验研究

作者：刘丹; 张煜; 彭莉晴; 周静; 邹庆伟

来源：中国现代医学杂志, 2018, 28(09): 22-27.

• Itch
• 超声介导微泡破裂技术
• 基因沉默
• 胃癌
• 免疫治疗

目的利用超声介导微泡破裂技术(UTMD)沉默T淋巴细胞Itch基因表达,观察转染T细胞对胃癌MFC细胞的免疫杀伤效率。方法免疫磁珠分离T淋巴细胞,构建靶向Itch基因的sh RNA表达质粒,超声微泡介导转染48 h后,流式细胞仪分析T细胞转染成功率,Western blot测定T细胞Itch蛋白表达。转染24 h后,流式细胞仪检测T淋巴细胞活化早期标志CD69表达。转染72 h后,观察对比单纯T淋巴细胞、阴性对照T淋巴细胞及转染T淋巴细胞与小鼠胃癌MFC细胞共培养时肿瘤杀伤率。结果利用UTMD技术介导sh RNA转染效率达到51.9%,Itch蛋白表达能被有效抑制。转染24 h后,转染组T淋巴细胞早期活化标志CD69表达较其他组更高。转染72 h后,与阴性对照组和空白组相比,在不同的效靶比水平(10∶1、20∶1、40∶1),转染T淋巴细胞杀瘤活性均增强。结论利用UTMD技术介导sh RNA转染能有效沉默Itch基因表达,促进T淋巴细胞免疫活性,增强T淋巴细胞对胃癌MFC细胞的免疫杀伤效率。

• 单位
  西南医科大学