白藜芦醇缓解低氧/复氧诱导的TCMK1细胞线粒体自噬

作者：**佳; 许海波^*

来源：基础医学与临床, 2022, 42(11): 1709-1715.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2022.11.1709

• 白藜芦醇
• 低氧/复氧
• TCMK1细胞
• 线粒体自噬

目的 研究白藜芦醇(Res)对低氧/复氧(H/R)导致小鼠肾小管上皮细胞系TCMK1内线粒体功能及线粒体自噬的影响。方法 体外建立H/R细胞模型，经Res或(和)线粒体自噬抑制剂1 (Mdivi-1)预处理TMCK1细胞2 h,采用CCK8法检测TCMK1细胞存活率；试剂盒法检测钙离子超负荷情况；流式细胞测量术测定线粒体膜电位(MMP)变化和活性氧(ROS)含量；Western blot检测线粒体融合蛋白(OPA)、分裂蛋白(DRP)以及凋亡相关蛋白cleaved caspase-3,Bax, Bcl2表达；免疫荧光检测线粒体外膜转位酶(TOMM20)和自噬溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)共定位情况。结果 与对照组相比，H/R组TCMK1细胞存活率显著减低(P<0.05),细胞内钙离子、ROS及MMP含量显著减低(P<0.05),OPA表达显著减低(P<0.05),同时DRP表达显著增高(P<0.05),线粒体与LAMP2共定位的细胞数目显著减少；与H/R组相比，10μmol/L Res可以显著增加TMCK1细胞的存活率(P<0.05),抑制细胞内ROS的释放、钙离子超负荷及MMP的下降(P<0.05),同时促进OPA表达而抑制DRP表达(P<0.05),增加线粒体与LAMP2共定位的细胞数目。与(H/R+Res)组相比，在其基础上给予Mdivi-1后，凋亡执行蛋白Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高，抗凋亡蛋白Bcl2表达降低(P<0.05)。结论 Res缓解H/R诱导的TCMK1细胞损伤，至少部分通过激活线粒体自噬，维护线粒体动力学稳态而实现。

• 单位
  九江市第一人民医院