Fibulin-1蛋白的真核表达与ELISA检测方法的建立

作者：张剑文; 刘炜; 傅斌生; 张彤; 郑**; 台艳; 杨扬; 张琪; 陈规划

来源：中华腔镜泌尿外科杂志(电子版), 2013, (06): 477-480.

DOI：10.3877/cma.j.issn.1674-3253.2013.06.017

• Fibulin-1蛋白
• 真核表达
• 酶联免疫吸附测定 Fibulin-1
• Eukaryotic Expression
• ELISA

目的建立检测血清中Fibulin-1蛋白浓度的ELISA方法。方法构建Fibulin-1蛋白真核表达载体,以人Fibulin-1基因编码序列为模板,将目的片段定向克隆入载体并转入毕赤酵母菌,进行Fibulin-1蛋白的真核表达。表达产物纯化后,Western blotting检测证明纯化的重组蛋白的抗原特异性。以该蛋白为定标绘制标准曲线,建立人血清ELISA检测方法并检测其精密度和回收率,最后初步分析人血清中Fibulin-1的含量。结果从真核表达体系获得了纯化的Fibulin-1蛋白,其具有良好的抗原特异性;建立的ELISA方法线性相关系数R2=0.98,线性范围为12.5~800 ng/m...

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院; 中山大学附属第三医院