Wnt5a介导Wnt/Ca2+通路对BCG诱导牛原代肺泡上皮细胞自噬的调控作用

作者：陈琪; 杜长征; 郑雪迪; 马伯利; 徐金瑞^*; 杨易^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(11): 4071-4080.

• Wnt5a
• BCG
• 牛肺泡上皮细胞
• 细胞自噬

旨在探讨体外分离培养牛肺泡上皮细胞(bovine alveolar epithelial cells, BAECs)的方法及Wnt5a对牛结核分枝杆菌卡介苗(bacille Calmette-Guérin, BCG)感染BAECs细胞自噬的调控机制。试验选用酶联合消化法和机械刮刷法分离细胞，差速贴壁法纯化BAECs,免疫荧光染色检测上皮细胞标志物角蛋白14 (cytokeratin 14,CK14)和角蛋白5(cytokeratin 5,CK5)的表达；BCG感染BAECs,并用Box-5抑制Wnt5a的表达，Western blot和免疫荧光染色检测自噬相关蛋白及非经典Wnt信号通路相关蛋白的表达。结果表明，采用酶联合消化法和机械刮刷法能够成功分离纯度较高的BAECs,细胞经CK14和CK5鉴定为阳性；BCG感染BAECs促进Wnt5a表达，增加细胞自噬，Box-5预处理下调BCG诱导的细胞自噬相关蛋白LC3II、P62、Atg7及Atg5的表达，且抑制非经典Wnt/Ca2+信号通路相关蛋白Wnt5a、CaMKII及NFAT的表达。综上，试验成功建立BAECs分离培养方法，BCG感染增加BAECs内Wnt5a表达和细胞自噬，抑制Wnt5a下调BCG诱导的BAECs细胞自噬，且Wnt5a是通过非经典Wnt/Ca2+信号通路调控BCG诱导的BAECs细胞自噬。

• 单位
  宁夏大学; 生命科学学院