副溶血性弧菌多克隆抗体制备及应用

作者：魏春豪; 迟海; 杨光昕^*; 陶乐仁

来源：食品与发酵工业, 2020, 46(08): 157-166.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.022939

• 副溶血性弧菌
• 多克隆抗体
• ic-ELISA
• 水产品
• 致病菌

以热灭活副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP ATCC17802)免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,用间接酶联免疫吸附法测定抗血清效价,纯化后的多克隆抗体效价为512 000。该抗体与5株副溶血性弧菌均能特异性结合,但与其他12株非副溶血性弧菌无交叉反应。在此基础之上建立了间接竞争酶联免疫吸附法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA),并优化了抗原抗体浓度、二抗浓度、封闭液等条件。结果表明,该法的线性范围为5×104～107CFU/m L,线性回归方程为y=0. 21x-0. 74(R2=0. 99),IC50为106CFU/m L,最低检出限为1. 7×104CFU/m L,板内变异系数为2. 61%～4. 15%,板间变异系数为4. 71%～8. 74%。用建立的ic-ELISA检测市场中鱼、贝类养殖水和实验室用水中的VP,实验结果与国标检测方法的结果一致。该方法快速便捷,灵敏度高,准确性好,为进一步研究VP的快速检测奠定了基础。

• 单位
  中国水产科学研究院东海水产研究所; 上海理工大学