结核分枝杆菌ESAT6-Fc DNA疫苗的免疫效应评价

作者：姚思; 杨洁琼; 杨雨欣; 李慧; 王天松; 张炜; 马国荣; 万巧凤^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(08): 897-901.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003972

• 结核分枝杆菌
• Rv3875基因
• 真核表达载体
• 体液免疫
• 细胞免疫
• DNA疫苗

目的 评价结核分枝杆菌ESAT6-Fc DNA疫苗的免疫效应，为下一步疫苗抗M.tb感染的保护性试验奠定基础。方法 将雌性C57BL/6J小鼠随机分为2组，每组5只，分别经大腿肌内注射含HSV2gD信号肽基因、Rv3875基因和小鼠Fc基因(共1 116 bp核苷酸)的重组质粒pcD-ESAT6-Fc及PBS，剂量均为50μg/条腿，共100μg。初次免疫后每周免疫1次，连续免疫3次。初次免疫后14、28、42 d采血，分离血清，采用间接ELISA法检测血清中IgG、IgG1及IgG2a抗体效价；采集初次免疫后42 d的血清及脾脏，分离脾细胞，采用流式细胞术检测分泌IFNγ的CD4+及CD8+T细胞比例，ELISA法检测血清中IFNγ和IL-2含量。结果 初次免疫后14 d，重组质粒免疫组小鼠血清中即可检测到特异性IgG、IgG1及IgG2a抗体，且抗体效价持续升高；初次免疫后42 d，重组质粒免疫组CD3+CD4+IFNγ+和CD3+CD8+IFNγ+细胞比例以及IFNγ和IL-2含量均显著高于PBS组(t分别为12.43、13.35、7.04和6.65,P均<0.001)。结论 重组质粒pcDESAT6-Fc可有效诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答，为ESAT6-Fc DNA疫苗的进一步研制奠定了实验基础。

• 单位
  基础医学院; 宁夏医科大学