槲皮素对H2O2诱导的正常人黑素细胞氧化损伤的保护作用

作者:黄海艳; 王芳; 丁晓岚; 徐前喜; 赵明福; 王利娟; 杜娟; 张建中
来源:中国皮肤性病学杂志, 2014, 28(10): 1012-1017.
DOI:10.13735/j.cjdv.1001-7089.2014.1012

摘要

目的采用过氧化氢(H2O2)诱导细胞氧化应激模型,探讨天然黄酮类化合物槲皮素对正常人黑素细胞的氧化损伤是否具有保护作用。方法体外培养的PIG1正常人黑素细胞中分别加入不同浓度的H2O2(0,0.25,0.5,0.75,1,1.25,1.5mmol/L)作用24h,确定氧化损伤最佳浓度,建立氧化应激模型。实验分组:正常对照组、H2O2组、槲皮素(10,20,40μmol/L)预处理2h+H2O2组,分别采用光镜、CCK-8、annexin-V/PI双染流式细胞仪、电镜、DCFH-DA检测槲皮素对H2O2所致黑素细胞氧化损伤后细胞形态学、活力及凋亡、微观结构和细胞内活性氧自由基(ROS)的影响。结果与空白对照组相比,随着H2O2浓度增加,细胞活力下降,1mmol/L H2O2作用24h后细胞活力下降至(55±9.8)%,接近IC50,确立氧化应激模型(H2O2浓度为1mmol/L,时间为24h)。与H2O2组相比,槲皮素组的细胞活力随槲皮素浓度增加而增加(P均<0.01);1040μmol/L槲皮素组细胞凋亡率随槲皮素浓度增加较H2O2组明显下降(P均<0.01);槲皮素可减轻H2O2作用后黑素细胞形态和微观结构改变;40μmol/L槲皮素组细胞内ROS水平较H2O2组明显下降(P<0.01)。结论槲皮素预处理可防止H2O2所致氧化损伤引起的正常人黑素细胞凋亡,降低细胞内ROS,对氧化损伤的黑素细胞有保护作用。

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