摘要
循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells,CTCs)是液体活检的重要手段之一,也是非侵入性的个体化实验诊断工具。以FDA首个批准的CTCs检测平台Cell Search为代表的商品化CTCs分离平台已被证实可有效富集监测CTCs,但出现上皮—间质转化的CTCs因不表达上皮细胞粘附分子而可能被漏检。此外大多CTCs检测平台因无法区分活细胞和死细胞而不能有效反映CTCs功能状态,因此如何利用常规设备开发新型分离方法用于检测具有转移潜力的CTCs具有更加重要的现实意义。插入人端粒酶启动子和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的复制选择性溶瘤病毒,主要为单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)和腺病毒(Adenovirus,ADV)具有特异示踪CTCs的作用。肿瘤细胞感染重组病毒24 h后稳定表达GFP,通过荧光显微镜或流式细胞仪直接检测荧光信号即可对CTCs进行计数,结合PCR、测序等方法亦可进行相关下游分析。此外,通过基因工程改造的复制选择性溶瘤病毒仅在活细胞中生长繁殖,有利于在早期发现具有转移潜能的高活性CTCs。以重组病毒为基础的CTCs检测方法灵敏准确、简便易行,具有较好的临床应用前景。
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单位天津医科大学; 天津医科大学第二医院