DNMT3A对高糖环境下小鼠心肌成纤维细胞增殖与迁移的影响

作者：孙赫; 涂彬; 宋凯; 周洋; 李锐; 王娟; 孙峰; 沙纪名; 徐盛松; 张野; 陶辉^*

来源：中国药理学通报, 2023, 39(03): 555-560.

• DNMT3A
• 心肌成纤维细胞
• 高糖
• 增殖
• 迁移
• 糖尿病性心肌病

目的 探讨DNA甲基化转移酶3A(DNA methyltransferases 3A,DNMT3A)在高糖环境下对小鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFs)增殖与迁移的作用。方法 取新生C57乳鼠心脏，剪碎后提取CFs,在显微镜下观察并鉴定形态。细胞贴壁后分别在低糖(5.5 mmol·L-1)培养基和高糖(33.0 mmol·L-1)培养基下培养，并使用DNMT3A慢病毒(沉默DNMT3A基因)处理。应用qRT-PCR方法检测DNMT3A、α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)和Ⅰ型胶原A1(CollagenⅠA1,Col1A1)的mRNA表达变化；应用Western blot方法检测DNMT3A、α-SMA、Col1A1的蛋白表达变化；CCK-8与MTT法检测CFs增殖活性；划痕实验与Transwell迁移实验检测CFs迁移能力。结果 与低糖培养的对照组CFs相比，高糖环境诱导了CFs的DNMT3A表达水平升高与胶原纤维沉积，同时CFs的异常活化明显增强。使用慢病毒处理沉默高糖环境下CFs DNMT3A表达后，与空载体组相比，沉默组DNMT3A表达下调，胶原纤维沉积减少，同时CFs的异常增殖与活化明显降低。结论 沉默DNMT3A能抑制高糖诱导的胶原沉积与CFs异常活化增殖，DNMT3A通过刺激高糖环境下CFs异常活化与增殖导致糖尿病心肌纤维化和DCM的发生与发展。

• 单位
  安徽医科大学; 安徽医科大学第二附属医院