从纤支镜刷落细胞提取微量RNA并检测Foxp3基因表达

作者：王琦; 张行; 周畔; 张敷彪; 曹江

来源：全科医学临床与教育, 2008, (03): 204-206+210+172.

• 纤维支气管镜
• 刷落细胞
• 微量RNA提取
• Foxp3

目的建立纤维支气管镜刷落细胞提取微量核糖核酸(RNA)的方法,检测分析调节性T细胞(Treg)Foxp3基因在肺癌及肺良性疾病患者中的表达水平。方法以磁珠吸附法提取154例肺癌及肺良性疾病患者纤支镜刷脱细胞的微量RNA,以实时荧光定量RT-PCR的方法检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在肺癌及肺良性疾病患者中的表达水平。结果平均总RNA提取量为5.08μgRNA/例,最低为3.20μg,最高为15.25μg。肺癌患者组中Foxp3 mRNA的表达水平(0.0000～13682.0805,四分位数间距0.0011)显著高于肺良性疾病组(0.0000～0.0061,四分位数间距0.0000)(Z=-3.508,P<0.01),肺癌患者组中Foxp3的阳性率(29.34%,27/92)亦明显高于肺良性疾病组(3.23%,2/62)(χ2=16.535,P<0.01)。结论利用纤支镜毛刷刷取病灶部位涂片后毛刷中的剩余细胞,采用磁珠吸附的方法可以提取微量RNA,并用于基因表达水平的检测。

• 单位
  临床医学研究所; 浙江大学