实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体

作者：朱丽娜; 张晶波; 陈梅玲; 温博海; 牛东升; 李青凤; 孙长俭; 杨晓

来源：中国人兽共患病学报, 2006, (03): 228-231.

DOI：10.3969/j.issn.1002-2694.2006.03.010

• 恙虫病东方体
• 实时荧光定量PCR Orientia tsutsugamushi
• quantitative real-time PCR

目的建立检测恙虫病东方体的实时荧光定量PCR(quantitative real-ti me PCR)方法。方法根据恙虫病东方体56kD外膜蛋白基因序列设计引物和探针,以克隆的56kD基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。结果建立的荧光定量PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.999)。荧光定量PCR检测恙虫病东方体的灵敏度约为套式PCR的100倍,并且具有良好的重复性。用该定量PCR检测其它相关立克次体和病原菌DNA样本,检出结果均为0。用该定量PCR检测恙虫病东方体实验感染小鼠的血、脾脏、肺脏、肝脏标本,结果脾脏中东方体出现最早和检出量最多,...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院