miR-30a-5p在人乳腺癌MCF-7细胞对他莫昔芬耐药性中的作用研究

作者：张欣颖; 金湛; 甘椿椿^*

来源：中国现代应用药学, 2022, 39(06): 764-771.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2022.06.008

• miR-30a-5p
• 自噬
• 乳腺癌细胞
• 他莫昔芬
• 耐药性

目的 探究miR-30a-5p在人乳腺癌MCF-7细胞对他莫昔芬(tamoxifen,TAM)耐药性中的作用，并阐明相关作用机制。方法 通过短时间高浓度TAM刺激MCF-7细胞诱导耐药株，MTT法检测细胞耐药性的改变；qRT-PCR法检测MCF-7细胞及其耐药细胞株MCF-7/TAM中miR-30a-5p的表达情况；吖啶橙染色及Western blotting检测MCF-7/TAM细胞相对于MCF-7细胞自噬的变化；转染miR-30a-5p模拟物后，采用MTT法检测MCF-7/TAM细胞对TAM敏感性的变化，并通过吖啶橙染色和Western blotting观察miR-30a-5p对MCF-7/TAM细胞自噬的影响；采用生物信息学方法对miR-30a-5p进行靶基因预测，荧光素酶报告基因试验验证miR-30a-5p对ATG5的靶向调控作用；Western blotting检测miR-30a-5p对ATG5表达的影响。结果 TAM对MCF-7/TAM细胞的抑制作用明显弱于对MCF-7细胞；miR-30a-5p在MCF-7/TAM细胞中的表达水平明显低于在MCF-7细胞中；相对于MCF-7细胞，MCF-7/TAM细胞的自噬水平明显升高；过表达mi R-30a-5p后，MCF-7/TAM细胞对TAM敏感性显著增加，自噬水平显著降低；Targetscan软件分析表明ATG5是miR-30a-5p的下游靶基因，通过荧光素酶报告基因试验进一步证明miR-30a-5p靶向调控ATG5;MCF-7/TAM细胞中上调miR-30a-5p能够抑制ATG5的表达。结论 miR-30a-5p靶向调控ATG5，并能够抑制细胞的自噬，进而增强乳腺癌细胞对TAM的敏感性。

• 单位
  浙江中医药大学; 衢州职业技术学院