E6流式细胞仪检测CD34+细胞百分比和绝对计数方法的建立

作者：付笑迎; 张小玲; 刘梦桐; 余阅; 陈诗杨; 彭冬; 邝雅贤; 刘四喜; 陈运生^*

来源：分子诊断与治疗杂志, 2020, 12(08): 1005-1009.

DOI：10.3969/j.issn.1674-6929.2020.08.006

• 异基因造血干细胞移植
• +细胞" name="keyword">CD34+细胞
• 流式细胞术
• 绝对计数

目的应用E6流式细胞仪建立检测CD34+细胞百分比和绝对计数的方法并进行验证。方法收集2019年1月至2019年12月在深圳市儿童医院血液肿瘤科因重型β-地中海贫血行异基因造血干细胞移植的患儿89例,以移植患儿供的骨髓或外周血为研究对象,应用E6流式细胞仪建立ISHAGE法检测CD34+细胞百分比,应用"流式直接体积法"计算CD34+细胞的绝对计数,并结合白细胞手工计数对CD34+细胞绝对计数的结果进行验证。结果结合白细胞手工计数对CD34+细胞的绝对计数结果的正确性进行验证,Pearson相关分析结果显示:供者外周血干细胞或骨髓干细胞CD34+细胞绝对计数流式结果与CD34+细胞绝对计数计算结果高度相关(r=0.93,R2=0.87,P<0.0001);两次供者外周血干细胞或骨髓干细胞白细胞计数和单个核百分比结果高度一致;同样,两次供者外周血干细胞或骨髓干细胞CD34+细胞流式计数百分比和绝对计数结果亦高度一致。结论应用E6流式细胞仪的"流式直接体积法"计算CD34+细胞绝对计数结果准确,可以作为造血干细胞移植术前计算供者外周血干细胞或骨髓干细胞CD34+细胞数目的可靠依据。

• 单位
  深圳市儿童医院; 嘉应学院医学院