二化螟dsRNA降解酶基因的克隆与表达分析

作者：彭英传; 江婷; 朱玉麟; 张万娜; 张晶; 韩召军; 肖海军^*

来源：植物保护学报, 2023, 50(03): 610-619.

DOI：10.13802/j.cnki.zwbhxb.2023.2021182

• 二化螟
• 非专一性核酸酶
• 基因克隆
• RNA干扰
• dsRNA降解酶

为解析二化螟Chilo suppressalis体内参与降解双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)的关键核酸酶的功能，克隆二化螟不同的非专一性核酸酶（non-specific nuclease,NUC）基因，并对这些基因进行生物信息学分析和组织定量表达分析，同时对dsRNA降解酶（dsRNA degrading nuclease,dsRNase）活力的组织分布进行研究。结果显示，共克隆获得5个NUC基因，其中有4个编码dsRNase亚家族基因（CsdsRNase1～CsdsRNase4）和1个编码Endonuclease G亚家族基因（CsEndoG）。5个NUC基因的开放阅读框核苷酸序列长度范围为828～1 338 bp，编码275～445个氨基酸残基，其分子量大小为31.68～49.57 kD，预测等电点为5.48～9.42。CsdsRNase1和CsdsRNase2含有信号肽序列，两者相似度极高，且与家蚕Bombyx mori和斜纹夜蛾Spodoptera litura中具有dsRNA降解酶活力的dsRNase同源聚类；CsdsRNase1和CsdsRNase2均在二化螟中肠中高表达，这与中肠组织超高的dsRNA降解酶活力分布模式一致，表明这2个基因可能是中肠参与降解dsRNA的关键核酸基因。二化螟体内存在多条dsRNase基因序列，尤其是中肠中高表达的CsdsRNase1和CsdsRNase2可影响二化螟体内dsRNA的稳定性，从而影响RNA干扰效率。

• 单位
  江西农业大学; 北京林业大学; 南京农业大学; 昆虫研究所