神经源性膀胱幼鼠膀胱形态结构功能变化及转化生长因子β1通路相关蛋白表达

作者：陈燕; 马源; 何育霖; 刘二鹏; 邢栋; 杨兴欢; 朱文; 王庆伟; 窦启锋; 张会清; 文建国^*

来源：中华实用儿科临床杂志, 2020, 35(17): 1336-1340.

• 神经源性膀胱
• 纤维化
• 膀胱测压
• 转化生长因子β1

目的探讨脊神经双侧离断神经源膀胱(NB)幼鼠模型的膀胱形态结构功能变化及转化生长因子β1(TGF-β1)通路相关蛋白的表达。方法选取SD雌性幼鼠64只, 其中32只行L6+S1神经双侧离断建立NB模型, 32只行假手术作为对照。神经离断和假手术3、6、12、24周后行膀胱测压检查。收集对应膀胱组织行马松染色和天狼猩红染色分析胶原纤维变化, 免疫组织化学染色分析TGF-β1、Smad2、Smad6蛋白变化, 采用Western blot检测TGF-β1受体Ⅰ的蛋白水平变化。结果各NB神经离断组膀胱不稳定, 存在膀胱漏尿点压(BLPP), 膀胱无明显排尿收缩压;神经离断3、6、12周和24周鼠的膀胱基础压(22.10±2.51)、(18.20±1.52)、(31.20±2.82)、(41.10±3.41) cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)和膀胱容量(22.30±1.72)、(49.10±5.54)、(30.30±2.68)、(13.50±1.52) mL均明显高于假手术组[(3.51±0.45) cmH2O和(0.52±0.04) mL], 差异均有统计学意义(均P<0.01)。神经离断组膀胱组织横切面大小为先增大(3、6周)后变小挛缩(12、24周), 膀胱壁厚度先变薄(3、6周)后增厚(12、24周);膀胱质量随离断时间持续增加。马松染色结果显示, 神经离断大鼠的膀胱壁中正常纤维结缔组织逐渐紊乱, 膀胱壁分层结构逐渐解体, 平滑肌肥大增厚, 肌间胶原纤维逐渐增多, 染色变深。天狼猩红检测示神经离断24周的膀胱组织中Ⅲ型胶原纤维明显增多, Ⅲ型/Ⅰ型胶原纤维比例(3.14±0.71)明显高于对应的假手术组(0.88±0.21), 差异有统计学意义(t=7.48, P<0.01)。免疫组织化学染色发现, 神经离断膀胱组织中TGF-β1和Smad2表达随着离断时间逐渐升高, 通路抑制性蛋白Smad6随离断时间逐渐降低。Western blot显示TGF-β1受体Ⅰ蛋白水平在12、24周的表达分别高于对应的假手术组1.3、1.6倍(t=6.06、14.45, 均P<0.01)。结论脊神经双侧离断导致的幼鼠NB, 收缩功能瘫痪, 膀胱内压逐渐增高, 膀胱正常结构逐渐解体, 膀胱纤维化通路TGF-β1/Smads信号通路逐渐激活, 小儿NB发展的过程为膀胱纤维化, 临床治疗小儿NB应尽早预防膀胱纤维化。

• 单位
  郑州大学第一附属医院; 新乡医学院第一附属医院