摘要
本研究构建内生真菌酵母氨酸还原酶基因(saccharopine reductase, sac)功能互补载体pBARGPESac,制备sac缺失突变株M1的原生质体,将pBARGPE-Sac载体转化至M1原生质体后再生,构建和筛选出互补株C1。用RT-PCR技术检测转化子,并进行DNA测序,验证互补株。提取C1、M1及野生株OW7.8的苦马豆素(Swainsonine, SW),用HPLC-MS检测含量。结果显示:C1中检测出sac和hph的表达,sac cDNA测序正确。C1的SW水平高于OW7.8和M1 (p<0.01),说明sac促进了该内生真菌中SW的合成。通过对sac功能的研究,为明晰真菌SW合成途径提供基础数据。
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