摘要
目的:研究干扰TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)表达对人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞生长、分化及凋亡的影响。方法:应用慢病毒介导RNA干扰技术,下调NB4细胞TβRⅡ基因的表达,获得TβRⅡ-shRNA NB4细胞,CCK-8法检测细胞的活力,流式细胞术检测CD11b表达,并用瑞氏-吉姆萨染色法检测全反式维甲酸对细胞分化的影响; Annexin V-FITC/PI双荧光标记法及AO/EB染色观察三氧化二砷对细胞凋亡的影响。结果:TβRⅡ-shRNA NB4细胞的活力高于NB4细胞。采用不同浓度(0. 01、0. 02、0. 04、0. 08和0. 1μmol/L)的全反式维甲酸进行96 h的孵育后,2组细胞均出现分化现象(CD11b表达增加),并呈剂量依赖性,但TβRⅡ-shRNA NB4细胞的分化率低于NB4细胞。不同浓度(2、4和8μmol/L)的三氧化二砷孵育24 h后,2组细胞均出现凋亡现象(AO/EB染色),呈剂量依赖性,但TβRⅡ-shRNA NB4细胞凋亡率显著低于NB4细胞,其中用8μmol/L三氧化二砷孵育TβRⅡ-shRNA NB4细胞和NB4细胞24 h,凋亡率分别是(49. 15±2. 05)%和(66. 85±2. 41)%(P <0. 01)。结论:下调TβRII可以促进NB4细胞的生长,部分拮抗全反式维甲酸诱导的细胞分化及三氧化二砷诱导的细胞凋亡。
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单位福建医科大学附属协和医院