摘要

目的:分析和确认半枝莲碱(SBT)是否对骨肉瘤细胞具有一定的抑制作用,并对SBT抑制骨肉瘤细胞的相关分子机制进行初步解析。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)实验和克隆形成实验检测细胞增殖,Horchest 33258染色检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移能力,细胞侵袭迁移实验检测细胞侵袭能力;蛋白质印迹法检测凋亡相关分子B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(BAD)、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL2)和活化的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)的蛋白水平,β-连环蛋白(β-catenin)、原癌基因(C-myc)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、糖原合成酶激酶-3β(GSK3β)的蛋白水平及GSK3β第9位丝氨酸(Ser9)的磷酸化水平;荧光素酶报告基因实验检测TopLuc荧光素酶活性。结果:SBT可抑制骨肉瘤细胞的增殖,减弱细胞迁移和侵袭;促进骨肉瘤细胞发生凋亡,抑制BCL蛋白水平但上调BAD和cleaved caspase 3蛋白水平;抑制TopLuc荧光素酶活性、Ser9的磷酸化,下调β-catenin及其靶分子C-myc和Cyclin D1的蛋白水平,最终使Wnt/β-catenin信号失活。结论:SBT可抑制人骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,促进骨肉瘤细胞发生凋亡,这可能与SBT抑制Wnt/β-catenin信号途径有关。

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