中华绒螯蟹血细胞cDNA文库的构建及质量初检

作者：赵大显; 张浩; 吴萍; 陈立侨

来源：大连海洋大学学报, 2010, 25(03): 191-196.

DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.2010.03.014

• 中华绒螯蟹
• cDNA文库
• 血细胞
• 表达序列标签

为了筛选中华绒螯蟹Eriocheir sinensis血细胞免疫的相关基因,促进蟹类免疫防治的进展,采用Gubler-Hoffman法构建了中华绒螯蟹血细胞的cDNA文库。结果表明:该文库初始滴度为4.50×106cfu/mL,库容为3.3×106cfu/mL,重组率为73%,插入片段大小多为8002 500 bp。随机挑取了94个重组子进行测序初检,共得到93条平均长度为511 bp的表达序列标签(EST)序列,对所测EST序列进行拼接,得到75条一致性序列,包括15条重叠群(Contigs)和60条单一序列(Singleton)。对测序结果进行比对分析,获得了15条已报道有一定功能的一致性序列,其中4条与免疫相关;另外60条一致性序列还未见报道。研究表明,中华绒螯蟹血细胞cDNA文库已构建成功,且质量较高,从而为开展中华绒螯蟹功能基因克隆、分析和功能基因组学研究奠定了基础。

• 单位
  南昌大学生命科学与食品工程学院; 生命科学学院; 华东师范大学