特异性抗细胞表面分子单链抗体的分离和鉴定

作者：许静; 吴立华; 徐洁; 刘俊霞; 孟磊; 何一心; 宋增璇

来源：中国免疫学杂志, 2007, (09): 839-841+846.

• 噬菌体展示
• 引导选择
• 表面分子
• 单链抗体 Phage display
• Pathfinder selection
• Surface molecule
• ScFv

目的:从抗KG1a细胞的噬菌体展示文库中分离和鉴定抗造血干/祖细胞表面分子单链抗体(scFv),克隆其基因并研究其对应抗原在不同细胞表面的分布。方法:用完整的KG1a细胞吸附法富集文库3轮,再用CD44单克隆抗体为引导分子进行引导选择,分离单克隆后用间接免疫荧光法鉴别其细胞结合特异性。对具有不同细胞结合特异性的克隆进行DNA序列分析,用一级结构不同的单链抗体作免疫印迹鉴别抗原分子量。结果:间接免疫荧光结果显示,64个阳性克隆分别识别不同的细胞系,分属3种细胞结合谱,DNA序列测定结果证明C95、H1两个克隆具有独特的一级结构,利用Westernblot成功测定它们特异性识别KG1a细胞膜蛋白的...

• 单位
  中国协和医科大学; 中国医学科学院; 实验血液学国家重点实验室