摘要
目的利用单因素实验法建立和优化临床替考拉宁(TEC)HPLC分析方法,为临床合理用药和药动学研究提供检测方法。方法用甲醇沉淀处理血液标本,Waters ODS2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱为分析柱,利用单因素实验法优化色谱条件。实验设计通过改变柱温、p H、流动相的组成比例,验证每种条件对各成分分离度(R)、理论板数(N)和拖尾因子(T)的影响,并用所建立的方法研究TEC在大鼠肝脏和血清中的分布动力学。结果优化后流动相为0.05 mol·L-1KH2PO4缓冲溶液-乙腈(22∶78),用磷酸调p H至2.65,波长为200 nm,流速为1.2 m L·min-1,柱温30℃,进样量为100μL。TEC的最低检测质量浓度为0.1 mg·L-1,在0.2204.8 mg·L-1内线性较好(r=0.995 8),相对回收率为(98.66±8.38)%100.75±8.32%,平均日内、日间精密度(RSD)分别为9.83%和9.87%,分离度(R)为1.5。以15 mg·kg-1单剂量静脉给药的大鼠,3 h后测得血清和肝脏中TEC质量浓度分别为(152.5±7.01)mg·L-1和(14.99±3.54)mg·L-1,21 h后得血清和肝脏质量浓度分别为(3.19±1.53)mg·L-1和(13.39±2.39)mg·L-1。结论该方法灵敏、快速、简便和特异性强且稳定可靠,适用于临床TEC血药浓度的监测及药动学的研究。
-
单位浙江省台州医院