Sirt3介导的SOD2在电离辐射中的作用研究

作者：林凯丽; 徐畅; 杜利清; 王彦; 李德冠; 刘建香; 苏旭; 樊赛军; 樊飞跃; 刘强

来源：中华放射医学与防护杂志, 2014, 34(08): 569-572.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2014.08.003

• 沉默信息调节因子3
• 超氧化物歧化酶2
• 活性氧
• 293T细胞
• 电离辐射

目的观察293T细胞经不同剂量137Csγ射线照射后,细胞中沉默信息调节因子3(sirt3)及相关抗氧化因子的变化,研究sirt3基因在辐射防护中的抗氧化活性机理。方法采用137Cs对293T细胞分别进行2、4、8和16 Gy照射,采用Real-Time PCR的方法,检测照后6、12、24和48 h,细胞中sirt3和超氧化物歧化酶2(SOD2)mRNA的表达水平变化;采用免疫印迹法,检测细胞中sirt3和SOD2蛋白水平随时间的变化;采用siRNA干扰和抑制剂处理的方法,检测sirt3与SOD2的作用关系;采用SOD Assay Kit-WST试剂盒检测细胞中SOD2酶活力的变化;流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)随时间的变化。结果各组细胞中sirt3和SOD2的mRNA水平和蛋白质水平均表现出不同程度的上升,与0 Gy组比较,分别在12 h(t=6.75、13.59、6.59、10.13,P<0.05)和24 h(t=6.80、8.73、11.09,P<0.05)达到最大值;sirt3 siRNA干扰和抑制剂处理结果显示sirt3是SOD2的上游调控因子;照射24 h后细胞中SOD2的活性显著增加,与0 Gy组比较,差异有统计学意义(t=46.04、23.19、26.28、14.70,P<0.05),细胞中ROS水平也发生相应变化。结论 sirt3可能通过对细胞中SOD2的表达量及活性的调控加强抗氧化保护系统,为临床辐射防护和治疗提供实验依据。

• 单位
  中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所; 放射医学研究所; 中国疾病预防控制中心; 中国医学科学院