摘要

以邻硝基苯磺酰氯为标记试剂,RP-HPLC为分析模式,建立了一种新的氨基酸衍生化方法。通过液质联用对产物进行定性,研究并确定了最佳衍生化条件:衍生温度25℃,缓冲液pH 9.0,衍生时间10 min。实验建立了20种氨基酸的HPLC分离方法:选用Kromasil C18柱,流动相A为30 mmol/L的NH4Ac溶液(pH7.5),B相为乙腈;采用梯度洗脱,检测波长275 nm,室温。20种氨基酸在0.025~6.4 mmol/L范围内线性关系良好,相关系数在0.998 0~0.999 8之间,检出限为0.01~0.113 nmol。