下调LncRNA SNHG3表达对人胃癌细胞MGC-803增殖、侵袭、凋亡的影响及机制

作者：谷建斌; 张国欣; 张玉斌; 张景承; 王雪平; 薛菲

来源：山东医药, 2020, 60(19): 34-38.

• 胃癌
• 长链非编码RNA
• 核仁小分子RNA宿主基因3
• 细胞增殖
• 细胞侵袭

目的探讨下调LncRNA SNHG3表达对人胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及可能机制。方法培养人胃癌MGC-803细胞,随机分为空白对照组、阴性对照组、SNHG3-siRNA组。SNHG3-siRNA组、阴性对照组分别转染LncRNA SNHG3-siRNA、阴性对照序列,空白对照组不予转染。应用siRNA技术下调LncRNA SNHG3的表达,通过CCK-8法、克隆形成实验、Transwell迁移和侵袭实验、流式细胞技术探讨LncRNA SNHG3表达对人胃癌细胞MGC-803增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。蛋白质印迹法(Western blotting)测定下调LncRNA SNHG3表达后胃癌细胞增殖和转移相关信号传导与活化转录因子3(STAT3)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、c-Myc和p-STAT3蛋白表达情况。结果与正常胃黏膜上皮细胞GES1相比,人胃癌细胞株MGC-803的LncRNA SNHG3相对表达量增高(P <0. 01)。siRNA转染胃癌细胞株MGC-803后SNHG3-siRNA组LncRNA SNHG3相对表达量0. 27±0. 03,低于空白对照组、阴性对照组(P均<0. 05)。下调LncRNA SNHG3表达,CCK-8法检测结果示,SNHG3-siRNA组OD450为0. 410 9±0. 001 5,siRNA组的增殖能力低于阴性对照组、空白对照组(P均<0. 01)。SNHG3-siRNA组、阴性对照组、空白对照组的克隆形成率分别为5. 89%±0. 44%、9. 48%±1. 17%、10. 00%±0. 76%,SNHG3-siRNA组克隆形成率低于阴性对照组、空白对照组(P均<0. 01)。MGC-803细胞转染SNHG3 siRNA 24 h后,细胞G2/M期比例下降至7. 15%±1. 08%,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P <0. 01)。下调LncRNA SNHG3表达后,MGC-803细胞凋亡率上升至10. 73%±0. 77%,与空白对照组(1. 54%±0. 57%)、阴性对照组(2. 34%±0. 84%)相比升高(P均<0. 001)。Transwell迁移实验结果显示,SNHG3-siRNA组、阴性对照组、空白对照组迁移到滤膜下表面的细胞数分别为(38. 6±1. 5)、(148. 6±10. 2)、(157. 0±18. 0)个/视野,SNHG3-siRNA组迁移细胞数低于阴性对照组、空白对照组(P均<0. 01)。SNHG3-siRNA组、阴性对照组、空白对照组迁移到滤膜下表面的细胞数分别为(31. 0±6. 6)、(91. 1±11. 1)、(90. 3±7. 5)个/视野,SNHG3-siRNA组穿膜细胞数低于阴性对照组、空白对照组(P均<0. 01)。下调LncRNA SNHG3后,MGC-803细胞STAT3、MMP-2、c-Myc、p-STAT3蛋白表达下降(P均<0. 05)。结论下调胃癌细胞中LncRNA SNHG3表达,胃癌细胞MGC-803的增殖能力、迁移及侵袭能力均受抑,凋亡增加;其机制可能通过下调STAT3、MMP2、c-Myc、p-STAT3蛋白表达实现。

• 单位
  石家庄市第一医院