摘要
目的 探究IL-34基因敲除对小鼠肠黏膜通透性的影响及相关机制。方法 选取20只6周龄SPF级雄性C57BL/6野生型(WT)小鼠作为研究对象,采用随机数表法分为WT组(WT小鼠)和KO组(IL-34-/-小鼠),每组10只。通过连续称量记录14周两组的体质量,观察IL-34基因敲除对小鼠体质量的影响。采用H-E染色法观察两组小鼠结肠的病理改变。采用免疫组织化学染色法、实时荧光定量PCR(real-time qPCR)法检测两组小鼠结肠组织中紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达。利用异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)评估IL-34基因敲除后对小鼠肠黏膜通透性的影响。在Caco-2细胞(人结直肠腺癌细胞)中观察IL-34对ZO-1和Occludin表达的影响。结果 KO组与WT组在14周内体质量的变化情况差异无统计学意义。H-E染色结果显示,WT组和KO组的结肠均无明显损伤表现。免疫组织化学染色结果显示,与WT组比较,KO组结肠组织中ZO-1和Occludin的表达水平均较低(P均<0.05)。KO组的血清FITC-dextran水平显著高于WT组(P<0.05)。与WT组比较,KO组的结肠组织中ZO-1 mRNA和Occludin mRNA的相对表达量均较低(P均<0.05)。蛋白质印迹法结果显示,IL-34可上调Caco-2细胞中ZO-1和Occludin的表达。结论 IL-34基因敲除可增高结肠黏膜的通透性,这可能是通过调控结肠组织中ZO-1和Occludin的表达实现的。
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