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摘要
目的 Kir6.2编码基因多态与糖尿病、胰岛素抵抗相关，本研究旨在探讨高糖环境下，利拉鲁肽对Kir6.2基因E23K位点突变的胰岛β细胞胰岛素分泌功能的影响及机制。方法 以NIT-1细胞为研究对象，构建Kir6.2基因过表达野生型和E23K突变型NIT-1细胞，并用利拉鲁肽在高糖环境下进行24 h干预。采用流式细胞仪检测NIT-1细胞凋亡率、细胞膜电位及钙离子浓度，Western blotting和免疫荧光检测细胞内胰岛素含量，ELISA检测培养液中胰岛素含量，并以此间接研究胰岛素的分泌情况。结果 NIT-1细胞最适高糖培养浓度为60 mmol/L,在此浓度下胰岛素合成量最高，利拉鲁肽体外干预浓度选择10 mmol/L。过表达野生型Kir6.2基因NIT-1细胞的胰岛素分泌高于Kir6.2基因E23K突变型NIT-1细胞。过表达野生型Kir6.2基因NIT-1细胞在高糖环境中细胞膜电位进一步降低，细胞内Ca2+含量增加，而Kir6.2基因E23K突变型NIT-1细胞与单纯高糖培养相比无显著改变。利拉鲁肽在高糖环境中可有效减少野生型和突变型NIT-1细胞的凋亡，降低膜电位，增加细胞内Ca2+含量，促进胰岛素分泌。另外利拉鲁肽对维持突变型NIT-1细胞存活作用更显著。结论 在高糖环境中，利拉鲁肽能改善Kir6.2基因E23K位点多态型胰岛β细胞的胰岛素分泌功能，该研究为利拉鲁肽的临床应用提供基础研究证据。
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