摘要

目的 探讨不全羧化骨钙素(ucOCN)对Erastin诱导小鼠海马神经元HT22铁死亡的作用。方法 以HT22海马神经元为研究对象,采用Erastin处理HT22细胞诱导铁死亡,实验分为CON组、ucOCN组、Erastin组、Erastin+ucOCN组。采用CCK-8细胞活力分析实验检测各组细胞的增殖情况,光学显微镜下观察不同组细胞形态变化,Live/Dead染色检测细胞存活情况,超氧化物阴离子荧光探针(DHE)检测细胞活性氧(ROS)含量,TMRE探针检测线粒体膜电位,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测siRNA序列对OCN的干扰效率,Western印迹实验检测不同组细胞铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白的表达水平。结果 以30μmol/l Erastin作用于HT22细胞24 h后明显降低了细胞活力,诱导细胞死亡,增加细胞内活性氧含量并降低了线粒体膜电位。与Erastin组相比,Erastin+ucOCN组细胞存活率有所升高,细胞内ROS水平显著降低,线粒体膜电位有所恢复;Western印迹实验结果显示,ucOCN能够促进铁死亡细胞内GPX4和SLC7A11蛋白的表达。结论 ucOCN对Erastin诱导细胞铁死亡具有抑制作用。