摘要
目的 观察毛兰素对人肝癌细胞系HEPG2增殖、迁移、凋亡和上皮间质转化的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HEPG2细胞分为对照组、毛兰素组、毛兰素+pc-DNA组、毛兰素+pc-Snail组:对照组仅为HEPG2细胞,毛兰素组加入40 nmol/L的毛兰素,毛兰素+pc-DNA组转染空白对照质粒pc-DNA并加入40 nmol/L的毛兰素,毛兰素+pc-Snail组转染Snail过表达质粒pc-Snail并加入40 nmol/L的毛兰素。各组细胞继续培养24 h后,采用平板克隆法观察各组细胞增殖能力,以细胞克隆个数表示;采用Transwell小室法观察各组细胞迁移能力,以细胞迁移个数表示;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;采用Western blotting法检测各组细胞Snail蛋白、凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)、间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)。结果 对照组、毛兰素组、毛兰素+pc-DNA组、毛兰素+pc-Snail组细胞克隆个数分别为(109.17±6.98)、(47.50±5.04)、(41.67±4.92)、(82.33±6.25)个,细胞迁移个数分别为(171.33±8.36)、(115.17±7.94)、(108.83±7.68)、(143.17±8.45)个,细胞凋亡率分别为1.83%±0.22%、29.57%±2.34%、32.79%±2.38%、16.16%±2.05%,其中毛兰素组和毛兰素+pc-DNA组细胞克隆个数、细胞迁移个数、细胞凋亡率无差异(P>0.05),其余组间细胞克隆个数、细胞迁移个数、细胞凋亡率相比,P均<0.05。与对照组相比,毛兰素组、毛兰素+pc-DNA组、毛兰素+pc-Snail组Snail、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),Bax、E-cadherin蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与毛兰素组和毛兰素+pc-DNA组相比,毛兰素+pc-Snail组Snail、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量均升高(P均<0.05),Bax、E-cadherin蛋白相对表达量均降低(P均<0.05)。结论 毛兰素可抑制HEPG2细胞的增殖、迁移和上皮间质转化,促进细胞凋亡,其机制与毛兰素可抑制Snail信号通路相关蛋白的表达有关。
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单位上海中医药大学附属龙华医院; 上海市静安区中心医院; 上海市中医医院