RSV诱导哮喘小鼠树突细胞自噬机制及五虎汤的干预作用

作者：张鑫; 王孟清^*; 罗银河; 胡燕; 丁伊; 江智豪

来源：湖南中医药大学学报, 2021, 41(01): 39-45.

• 儿童哮喘
• 五虎汤
• 呼吸道合胞病毒
• 树突细胞
• 细胞自噬
• PI3K/Akt/mTOR

目的研究PI3K/Akt/mTOR信号通路对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)诱导哮喘小鼠树突细胞(dendritic cells, DC)自噬的调控机制及五虎汤的干预作用。方法用RSV滴鼻联合雾化鸡卵清蛋白(ovalbumin, OVA)激发的方法制备哮喘小鼠模型,造模后的小鼠分为模型组、五虎汤低剂量组、五虎汤中剂量组、五虎汤高剂量组、地塞米松组、雷帕霉素组、氯喹组,每组10只,并设空白组(10只)对照。实验结束后PAS、Masson染色观察评价肺组织病变情况,并计算气道黏液储备指数与胶原沉积指数;电镜观察自噬小体;Western blot检测DC自噬相关蛋白及对PI3K/Akt/mTOR信号通路中关键蛋白PI3K、p-Akt、p-mTOR表达的影响。结果气道反应性结果显示造模成功。病理染色显示模型组小鼠气道黏液储备指数与胶原沉积指数较空白组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,五虎汤各剂量组及其他药物组哮喘小鼠气道黏液储备指数与胶原沉积指数降低,差异有统计学意义(P<0.01)。电镜下观察小鼠肺组织自噬小体显示模型组相较于空白组中自噬小体数量明显增加,各治疗组的自噬小体较模型组增加。Western blot显示,自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ在五虎汤各剂量组以及雷帕霉素组中的表达显著增高,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01);氯喹组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平较模型组降低(P<0.01);地塞米松组与模型组比较,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平相对表达无统计学差异(P>0.05);通路关键蛋白表达水平显示,五虎汤各剂量组及雷帕霉素组中PI3K、p-Akt和p-m TOR的蛋白表达水平与模型组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 RSV诱导哮喘小鼠树突细胞自噬水平上升,PI3K/Akt/mTOR信号通路被活化,五虎汤通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,进一步上调树突细胞的自噬,减轻气道重塑。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院