烷烃羟化酶基因alkB表达载体的构建及其在大肠杆菌中的诱导表达

作者：孙敏; 罗群; 何颖; 侯登勇; 王庆蓉; 沈先荣

来源：中华航海医学与高气压医学杂志, 2013, 20(1): 50-53.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1009-6906.2013.01.016

• 烷烃羟化酶
• 表达载体
• 诱导表达

目的 构建烷烃羟化酶基因alkB表达载体并检测其在大肠杆菌的表达.方法 体外合成alkB基因,选择烷烃表达载体pCom8,构建含alkB基因的重组质粒pCom8-alkB,并采用CaCl2法将其转入大肠杆菌DH5α中,通过十二烷基碘酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测不同诱导条件下的alkB基因表达的变化.结果 构建的含alkB基因的重组质粒在DH5α中得到有效表达,且随诱导时间的延长而增加,在柴油诱导浓度为2％～3％(V/V)时,目的蛋白表达量相对较大.结论 成功构建了含alkB基因的表达载体,阐明了不同诱导条件对目的蛋白表达的影响规律.

• 单位
  中国人民解放军海军医学研究所