猪流行性腹泻病毒N蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达及单克隆抗体制备

作者：柴茂; 马震原; 杨海波; 王淑娟; 刘影; 王东方; 赵雪丽; 王翠; 谢彩华; 王华俊; 闫若潜

来源：中国动物传染病学报, 2023, 1-9.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20230103.007

• 昆虫杆状病毒表达系统
• 猪流行腹泻病毒
• 单克隆抗体

利用昆虫杆状病毒表达系统(BEVS)表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白，并制备单克隆抗体。构建PEDV N基因重组穿梭质粒pFastBac-N，转化至感受态细胞DH10Bac中获取重组杆粒Bacmid-N，将Bacmid-N转染至SF9昆虫细胞中制备重组蛋白。将重组蛋白免疫小鼠，经融合、筛选、纯化出单克隆抗体，并测定单克隆抗体相关特性。获得重组杆状病毒rBV-N，获得大小为59 kDa 重组N蛋白(rN)，制备出抗N蛋白单克隆抗体3C8E3，该单抗为IgG1亚类，效价为1∶1.024×105，效价高、特异性强、稳定性好，更具实用性。本研究为PEDV 抗原/抗体诊断试剂盒、PEDV亚单位疫苗研究奠定了基础。

• 单位
  河南省动物疫病预防控制中心