微小RNA-342-3p靶向性别决定区Y框蛋白6对肝癌细胞增殖、周期和凋亡的影响

作者：王艳瑛; 吴伟; 王亚奇; 高志强^*; 马鹏; 郭凯

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(11).

• 微小RNA-342-3p
• 性别决定区Y框蛋白6
• 肝癌
• 增殖
• 周期
• 凋亡

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-342-3p靶向性别决定区Y框蛋白6(SOX6)对肝癌细胞增殖、周期和凋亡的影响及其分子机制。方法选取2021年6月至2022年6月驻马店市中心医院收集的121例原发性肝癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术分析肝癌组织和癌旁组织miR-342-3p表达水平;采用miRNA对照和miR-342-3p过表达慢病毒感染人肝癌细胞HepG2, 构建miRNA对照组和miR-342-3p组细胞, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析miRNA对照组和miR-342-3p组细胞的增殖;采用流式细胞术分析两组细胞的周期变化;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)凋亡试剂盒分析两组细胞的凋亡水平;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-342-3p的靶基因;蛋白质免疫印迹(Western blot)分析蛋白质表达水平。组间计数资料比较采用t检验。结果肝癌组织中miR-342-3p表达水平(1.23±0.22)明显低于癌旁组织表达水平(0.71±0.14), 差异有统计学意义(t=21.710, P<0.05)。miRNA对照组细胞吸光度(A)值(2.02±0.13)明显高于miR-342-3p组(1.61±0.09), 差异有统计学意义(t=6.441, P<0.05)。miRNA对照组细胞克隆形成率[(85.92±4.95)%]明显高于miR-342-3p组[(59.06±4.39)%], 差异有统计学意义(t=9.942, P<0.05)。miRNA对照组细胞体内成瘤体积[(690.67±72.49) mm3]明显高于miR-342-3p组[(59.06±4.39) mm3], 差异有统计学意义(t=9.942, P<0.05)。miRNA对照组细胞G0/G1期百分比[(41.33±2.58)%]明显低于miR-342-3p组[(58.33±2.93)%], 差异有统计学意义(t=10.980, P<0.05)。miRNA对照组细胞S期百分比[(39.17±2.71)%]明显高于miR-342-3p组[(28.33±3.31)%], 差异有统计学意义(t=5.911, P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡率[(2.63±0.95)%]明显低于miR-342-3p组[(16.33±2.29)%], 差异有统计学意义(t=13.510, P<0.05)。SOX6是miR-342-3p的靶基因。癌旁组织中miR-342-3p靶基因SOX6表达水平(1.01±0.12)明显低于肝癌组织表达水平(2.00±0.14), 差异有统计学意义(t=18.924, P<0.05)。miRNA对照组细胞SOX6蛋白表达水平(1.19±0.17)明显高于miR-342-3p组(0.62±0.11), 差异有统计学意义(t=6.924, P<0.05)。结论 miR-342-3p在肝癌组织中呈低表达, 通过靶向调节SOX6蛋白表达水平促进肝癌细胞的增殖, 抑制细胞凋亡水平。

• 单位
  郑州大学第一附属医院; 驻马店市中心医院; 黄淮学院