mRNA疫苗制备方法的优化及验证

作者：全纹萱; 周伃欣; 关山; 肖琴; 曾杰; 何久香; 赵镜; 林治华^*; 丁晓艳^*; 李晋涛^*

来源：免疫学杂志, 2023, 39(01): 78-85.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20230010

• mRNA疫苗
• 体外转录
• mRNA质量
• 细胞转染
• 活体成像

目的 筛选获得高效的mRNA疫苗制备方法，为mRNA疫苗研发提供参考。方法 本研究使用了A、B、C三种不同的mRNA疫苗体外合成方法，比较筛选出最优方法并在小鼠体内进行了效果验证。结果 3种方式合成的mRNA凝胶电泳条带清晰、完整，紫外分光光度法测定mRNA OD260nm/OD280nm均在1.9～2.0的范围之内，纯度较好。其中，C方法转录后mRNA的浓度最高且体外转录的eGFP mRNA转染细胞后，其表达量更高，持续时间更长。动物体内活体成像也表明，C方法转录的萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,Fluc)mRNA经脂质纳米颗粒递送可在动物体内高效表达，并且经该方法合成的登革病毒mRNA疫苗接种小鼠21 d后可产生体液免疫。结论 通过对比筛选出的C方法为mRNA疫苗制备的最佳方法，可用于后续各类mRNA疫苗研发。

• 单位
  基础医学院; 重庆理工大学; 生物工程学院; 中国人民解放军陆军军医大学